Directe immunofluorescentiedetectie

Bewijs van weefselstructuren, antilichamen en pathogenen door middel van immuunlabeling is populair, modern en nauwkeurig. Immunofluorescentie verwijst naar immuunlabeling met voorbereide, fluorescerende antilichamen die zijn gemaakt om te gloeien onder UV-licht.

Bij de Directe immunofluorescentiedetectie het substraat wordt rechtstreeks onderzocht met lichtgevende antilichamen, zonder primaire antilichamen of kunstmatige antigenen.

Wat is directe immunofluorescentiedetectie?

Tumorspecifieke antigenen in tumorweefsel kunnen direct worden gedetecteerd met immunofluorescentie. Hierdoor is het mogelijk om te achterhalen waar de bestaande uitzaaiingen in het lichaam vandaan kwamen.

Directe immunofluorescentiedetectie is een diagnostische methode gebaseerd op kennis van immunologie, immunokleuring en immunohistochemie. De focus ligt hier op het vermogen van antilichamen om te binden aan specifieke punten in weefsel of aan antigenen in een serum. Deze plaatsen zijn epitopen.

Bij biochemische diagnostiek zijn er kunstmatige antilichamen of mimetica (enkelvoud: mimetisch) die het mogelijk maken deze antilichaam-antigeen-bindingen te markeren door fluorescentie of radioactiviteit. Conjugaten van kunstmatige antilichamen binden enerzijds aan de epitopen en hebben anderzijds een fluorescerende marker in het geval van immunofluorescentie. Dit is een alternatief voor het gebruik van radioactieve markers. Het bijzondere van directe immunofluorescentie-detectie in vergelijking met indirecte detectie is dat het antilichaam dat zich bindt aan het epitoop van het antigeen in het onderzochte materiaal ook het antilichaamconjugaat met de fluorescerende marker vertegenwoordigt. Extra antilichamen zijn niet nodig voor directe detectie.

Fluoresceïne, dat schijnt onder UV-licht, en fluoresceïne-isothiocyanaat (FITC) worden gebruikt als kleurstoffen voor het maken van kunstmatige antilichaamconjugaten bij immunofluorescentie. Tot dusver leest het een beetje ingewikkeld, maar directe immunofluorescentiedetectie is een standaard diagnostische methode voor een medisch laboratorium voor een breed scala aan medische vragen. De antilichamen met de fluorescerende kleurstof zijn klaar voor verkoop.

Functie, effect en doelen

Immunofluorescentie directe detectie is beschikbaar voor weefselonderzoeken voor het kleuren van bepaalde structuren in weefsel. Maar ze zijn ook beschikbaar voor losse cellen. Flowcytometrie speelt hierbij een grote rol. Ten slotte zijn er de immuuntesten in de vaste en vloeibare fase. Immunofluorescentieonderzoeken van weefsels zijn vooral belangrijk in de oncologie, d.w.z. de medische behandeling van kankerziekten.

Tumorspecifieke antigenen in tumorweefsel kunnen direct worden gedetecteerd met immunofluorescentie. Deze onderzoeken op weefselmonsters van tumoren zijn vaak belangrijk om te achterhalen waar de bestaande uitzaaiingen in het lichaam vandaan komen, of om te kunnen beoordelen of een tumor goedaardig of kwaadaardig is. Het onderzoek van individuele cellen met directe immunofluorescentiedetectie wordt gebruikt om virusantigenen, bacteriële antigenen en andere epitopen te vinden.

U kunt bijvoorbeeld achterhalen of de cellen zijn geïnfecteerd door een virus en in welk stadium van de infectiecyclus de cellen zich bevinden. De naam FACS (= Fluorescence-Activated Cell Sorting) is een zeer efficiënte flowcytometrie-methode waarbij de met fluorescentie gemarkeerde cellen worden verdeeld over verschillende reageerbuizen, afhankelijk van het type kleur. Deze procedure is belangrijk in immunologie, hematologie en infectieziekten.

Immunofluorescentie-immunassays maken de directe detectie mogelijk van milieutoxines, genetisch gemodificeerde organismen en bepaalde additieven in voedsel. In deze experimentele opstelling is er altijd een vaste en een vloeibare fase. Talrijke ziekteverwekkers, waaronder het HIV-virus dat aids veroorzaakt, kunnen ook direct worden opgespoord. Bij het opsporen van infectieziekten en auto-immuunziekten is het echter vaak een kwestie van antilichamen opsporen in plaats van antigenen. Dit zijn de verdedigingsmoleculen die worden gevormd door het immuunsysteem van het lichaam. Volgens de hier gepresenteerde definitie zijn dergelijke bewijzen geen directe bewijzen, aangezien de fluorescerende antilichamen niet rechtstreeks koppelen aan de eigen antigenen van het lichaam, maar aan de antigenen van de testopstelling.

Deze antigenen in de experimentele opstelling zijn op hun beurt weer gekoppeld aan de eigen antilichamen van het lichaam. Immunofluorescentie directe detectie voor veel voorkomende infecties, bijvoorbeeld HIV-virussen en chlamydia, wordt alleen gebruikt bij speciale detectie- en bevestigingstests. Er zijn tests voor veel meer ziekten. In de meeste situaties is indirecte detectie van antilichamen geschikter voor infectieziekten, omdat het eigen immuunsysteem van het lichaam een ​​ingenieus vermogen heeft om eerdere infecties te onthouden. In andere situaties vullen directe detectie van antigenen en indirecte detectie van antilichamen elkaar aan. De laatste laten zien dat er eerder een infectie heeft plaatsgevonden, terwijl de eerste meer precieze informatie geven over de huidige status van de activiteit van de ziekteverwekker.

Uw medicatie vindt u hier

➔ Geneesmiddelen om het afweersysteem en het immuunsysteem te versterken

Risico's, bijwerkingen en gevaren

Bij directe immunofluorescentiedetectie, zoals bij alle medische bewijzen, zijn er twee risico's: het risico op een vals, positief resultaat en het risico op een vals, negatief resultaat. Valse, positieve resultaten veroorzaken psychisch ongemak en grote stress voor de patiënt.

Daarom worden aanvullende testprocedures toegevoegd aan positieve resultaten, vooral als de diagnose leidt tot drastische veranderingen in het leven. Het risico van een vals, negatief resultaat is dat de patiënt niet op tijd kennis neemt van de bedreiging voor zijn eigen gezondheid en misschien zelfs voor de volksgezondheid. Daarom is het goed om veel onderzoek te doen en een groot aantal verschillende immunofluorescentie directe detecties klaar voor verkoop te maken en aan te bieden. Samen met andere directe en indirecte detectiemethoden voor ziekten en pathologieën verhoogt dit de nauwkeurigheid van de diagnose.

Directe detectie is gebaseerd op het antilichaamconjugaat, dat enerzijds bindt aan de epitopen van de antigenen en anderzijds ook de fluorescentie veroorzaakt. Zo'n product wordt dus maar in één type testprocedure gebruikt en niet voor andere soorten testprocedures.Dit is een belangrijk procedureel verschil met het indirecte bewijs, waarbij de fluorescerende antilichamen worden voorafgegaan door primaire antilichamen voor epitoopbinding. Het antilichaamconjugaat is daarom geschikt voor verschillende testen. Dit procedurele verschil verschilt van het medische verschil tussen de indirecte detectie van antilichamen en de directe detectie van antigenen.