Immuno-elektroforese

De Immuno-elektroforese wordt gebruikt voor laboratoriumdiagnostische detectie van monoklonale antilichamen in het bloed van een patiënt. Monoklonale antilichamen zijn afkomstig van dezelfde cel en zijn gericht tegen dezelfde antigenen. Om deze reden moeten ze als pathologisch worden beoordeeld en, indien bewezen, spreken voor ziekten zoals de ziekte van Waldenström.

Wat is immuno-elektroforese?

Ionen hebben verschillende mobiliteit. Deze verschillende mobiliteit vormt de basis van de elektroferese procedure. Deze methoden scheiden verschillende stoffen van elkaar met behulp van elektrische velden en zwaartekracht. Een bekende methode in het veld is immuno-elektrofherese.

Dit is een kwalitatieve diagnostische methode die wordt gebruikt om monoklonale antilichamen te detecteren. Antilichamen zijn immunologisch actieve eiwitstoffen uit een specifieke cellijn. Monoklonale antilichamen zijn allemaal gebaseerd op dezelfde B-lymfocyten en zijn daarom gericht tegen een enkele epitoop. Elke natuurlijke immuunrespons op binnendringende antigenen komt overeen met een polyklonale respons en is daarom gericht tegen verschillende epitopen. Een monoklonale immuunrespons geeft dus aanwijzingen voor pathologische lichaamsprocessen.

Monoklonale antilichamen binden verschillende moleculen met een hoge specificiteit. Deze binding kan worden aangetoond door middel van immuno-elektroforese. De procedure is een kwalitatieve procedure in laboratoriumdiagnostiek en bestaat uit de twee soorten procedures, serumelektroforese en immunodiffusie.

Functie, effect en doelen

Immuno-elektroforese combineert de methodologie van serumelektroforese met immunodiffusie. Het serum van de patiënt wordt op een agarosegel of celluloseacetaatfilm geplaatst. Er wordt ook een controleserum aangebracht. De toepassing wordt gevolgd door een elektroforetische scheiding van de monsters. Antisera, IgG, IgA, IgM, azijnzuur voor normale elektroforese en kappa en lambda worden tussen de scheidslijnen aangebracht.

Hierdoor ontstaat een reactie met de antilichamen in het serum van de patiënt, waardoor neerslaglijnen ontstaan. Afhankelijk van het gebruikte antiserum en de positie en vorm van de afzonderlijke lijnen, kunnen conclusies worden getrokken over de immunoglobulinen in lichte ketens kappa of lambda. In het geval van een lambdaband zijn er vrije lichte ketens die zijn opgebouwd uit antilichamen. Het laboratorium levert aanvullend bewijs via het zeldzame IgE en IgD, waardoor een exacte bepaling van de immunoglobulinen mogelijk is. Een methode van immunodiffusie-elektroforese vindt plaats volgens Pierre Grabar en Curtis Williams en komt overeen met een combinatie van agarosegelelektroforese van eiwitten en antilichaamdiffusie.

Eerst vindt de agarosegelelektroforese plaats. Vervolgens diffunderen de aanwezige antilichamen tegen de banden van antigenen en creëren daardoor precipitaatbogen. Dit moet volgens Laurell worden onderscheiden van raket-immuno-elektroforese, die overeenkomt met de elektroforese van eiwitten in een agarosegel, die elk antilichamen in een bepaalde concentratie hebben. Er zit een enigszins basische buffer in de gel, die alleen de antigenen laat migreren en die de meeste antilichamen naar het iso-elektrische punt duwt door blootstelling aan de enigszins basische pH-waarde totdat ze niet meer elektroforetisch bewegen.

Aan het begin van een raket-immuno-elektroforese is er een overmaat aan antigeen, zodat oplosbare antigeen-antilichaamcomplexen worden gevormd. Tijdens elektroforese is er ook binding tussen antigenen en andere antilichamen. Op deze manier worden immunoprecipitaten gevormd op het equivalentiepunt, die lijken op raketachtige figuren met een hoogte evenredig met de antigeenconcentratie. De hoogte van het neerslag wordt gemeten om de test te evalueren.

Uw medicatie vindt u hier

Risico's, bijwerkingen en gevaren

De detectie van monoklonale antilichamen is van bijzonder belang voor de diagnose van multipel myeloom en de ziekte van Waldenström. Het geleverde bewijs spreekt voor een kwaadaardige degeneratie van immuuncellen. Multipel myeloom komt overeen met een kanker in het beenmerg, die wordt gekenmerkt door de kwaadaardige vermenigvuldiging van antilichaamproducerende cellen in het plasma.

Deze plasmacellen produceren antilichamen en hun fragmenten. Kwaadaardige plasmacellen zijn altijd afkomstig van een gemeenschappelijke precursorcel en zijn daarom genetisch identiek. Ze produceren alleen monoklonale antilichamen. De maligniteit van deze ziekte kan overeenkomen met een precancereus stadium, maar het kan ook een zeer kwaadaardig stadium bereiken, dat zonder behandeling snel dodelijk is. Symptomen van de ziekte zijn het gevolg van de kwaadaardige groei van de cellen of van de antilichamen en antilichaamfragmenten. De meest voorkomende symptomen zijn botpijn, botontbinding en spontane fracturen.

Het calciumgehalte in het bloed wordt vaak verhoogd. Bovendien worden de abnormale antilichamen vaak afgezet in het weefsel en veroorzaken functionele stoornissen in de organen, wat kan leiden tot symptomen zoals nierfalen of verminderde doorbloeding. De ziekte van Waldström is ook een kwaadaardige tumorziekte. Om precies te zijn, het is een kwaadaardige lymfoomziekte die wordt gerekend tot de langzaam voortschrijdende en bijna asymptomatische B-cel non-Hodgkin-lymfomen. In de meeste gevallen kan bij de ziekte een abnormale productie van monoklonaal IgM worden gedetecteerd als gevolg van de activiteit van de kwaadaardige lymfoomcellen.

De ziekte van Waldenström lijkt in zijn eigenschappen sterk op multipel myeloom, maar vertoont gewoonlijk een gunstiger verloop. De meeste patiënten met de ziekte van Waldenström zijn grotendeels asymptomatisch tegen de tijd dat ze worden gediagnosticeerd. Andere patiënten vertonen al vroeg symptomen, zoals niet-specifieke vermoeidheid of perifere neuropathieën, die worden veroorzaakt door de afzetting van monoklonaal IgM in de myeline-omhulling. Zelfs kleine hoeveelheden IgM kunnen polyneuropathie veroorzaken. Bij andere patiënten treedt geen polyneuropathie op, zelfs niet bij hoge concentraties. Bovendien kunnen niet-specifieke symptomen optreden zoals koorts, ongewenst gewichtsverlies of nachtelijk zweten. Botpijn is ook kenmerkend.

Door de overproductie van IgM wordt het bloed hyperviscus, waardoor de genoemde symptomen geassocieerd kunnen worden met die van een hyperviscositeitssyndroom. In de meeste gevallen manifesteert deze bloedingsneiging zich in frequente neusbloedingen, hoofdpijn, algemeen gevoel van onwel zijn of wazig zien en akoestische klachten. Om kwaadaardige ziekten van dit type op te sporen, is immuno-elektrofherese lang een standaard diagnostische procedure geworden.